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PCR Neue Produkte für lange PCR-Konstrukte und RT-qPCR

| Redakteur: Dr. Ilka Ottleben

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Mit dem GoTaq Long PCR Master Mix können sehr lange DNA-Fragmente amplifiziert werden. (Bild: Promega)
Mit dem GoTaq Long PCR Master Mix können sehr lange DNA-Fragmente amplifiziert werden. (Bild: Promega)

Um die Effizienz von PCR-Reaktionen weiter zu steigern, hat Promega zwei neue Gotaq-Produkte in den Markt eingeführt: Das Gotaq 1‑Step RT‑qPCR System ermöglicht Wissenschaftlern, reverse RNA-Transkription und DNA-Amplifikation in einem Ansatz durchzuführen. Mit dem Gotaq Long PCR Master Mix können sehr lange DNA-Fragmente von bis zu 40 Kilobasen (kb) Lambda-DNA oder 30 kb humaner genomischer DNA amplifiziert werden.

Zwei Reaktionen, ein Ansatz

Mit dem Gotaq 1-Step RT-qPCR-System lassen sich geringe Mengen an RNA-Template über ein breites Konzentrationsspektrum zuverlässig, schnell und effizient quantifizieren. Bei der Entwicklung des Systems hat Promega die Technologie zur cDNA-Synthese (über das Goscript Reverse Transcription System) mit der des Gotaq qPCR Master Mixes zur Quantifizierung von DNA kombiniert. Die Quantifizierung erfolgt über den Fluoreszenzfarbstoff BRYT Green, der dsDNA oftmals sensitiver detektiert als SYBR Green I. Verwendet werden kann das modifizierte System mit allen gängigen Real-Time-Instrumenten.

Hohe Genauigkeit bei langen PCR-Konstrukten

Im Gotaq Long PCR Master Mix ergänzen sich eine Hot-Start- und eine Proofreading-DNA-Polymerase: Mit der schnellen Hot-Start-Polymerase lassen sich sehr lange DNA-Fragmente amplifizieren, während die 3‘ nach 5‘ Exonuklease-Funktion der Proofreading-Polymerase fehlgepaarte Basen korrigiert. Der Master Mix ist nach Zugabe von Template, Wasser und Primern sofort anwendbar.

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