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Hellfeldmikroskopie Spectral Unmixing – eine neue Untersuchungsmethode für die IHC

Redakteur: Dr. Ilka Ottleben

LOT-Oriel bietet mit dem CRi Nuance ein System insbesondere für die Hellfeldmikroskopie an, das spezifische vierfach- und fünffach-Färbungen plus Counterstain ermöglicht. Die multispektrale Aufnahmetechnik erlaubt durch „Unmixing“ die spektrale Trennung stark überlappender Signale, wie sie in jedem Hellfeldpräparat zu finden sind.

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Dieses „Unmixing“ erzeugt aus den mehrfach gefärbten Schnitten virtuelle Einzelfärbungen. Das CRi Nuance erfasst in bis zu einem Nanometer kleinen Schritten das gesamte Spektrum der Probe. Auch zuvor nie gesehene Signale, da schwach gefärbt und zudem stark mit anderen Stains überdeckt, werden damit sichtbar und quantifizierbar, heißt es in einer Pressemeldung des Unternehmens. Multiplex-Hellfeld-Präparate werden vor allem dann angefertigt, wenn Kolokalisierung gemessen werden soll. So zeigt z.B. die gleichzeitige Anwesenheit von ER und PR (Estrogen- und Progesteronrezeptor) eine Schwangerschaft oder eben in der weiblichen Brust Krebs an. Diese Kolokalisierung von ER und PR mit Hilfe von spezifischen Einzelfärbungen zu messen ist auch bei dünnen Schnitten aufgrund von Verschiebungen im Gewebe sehr schwierig. Mit dem CRi Nuance werden beide Stains gleichzeitig in einem einzigen Schnitt verwendet. Trotzdem können sie getrennt von einander analysiert werden. Neben der Zeitersparnis gegenüber Einzelfärbungen ist laut Hersteller vor allem die Genauigkeit der Ergebnisse bei Kolokalisierungsmessungen hervorzuheben.

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