Auswahl der „richtigen“ DC-Schicht
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Neben dem Laufmittel bestimmt die Schicht der DC-Platte die chromatographische Trennung. Ein umfangreiches Schichtensortiment stellt den Analytiker hier vor die „Qual der Wahl“.??Wie findet der Anwender die für sein Problem geeignete Schicht???Ebenso wie in der HPLC kann in der Dünnschichtchromatographie (DC) Normalphasen- und Umkehrphasen-Chromatographie betrieben werden. Anders als in der HPLC ist in der DC/HPTLC (Hochleistungs-DC) jedoch das Kieselgel die mit Abstand am häufigsten eingesetzte stationäre (Normal-)Phase. Dies liegt besonders an dessen enormer Selektivität in Kombination mit einem fast unbegrenzten Sortiment organischer Lösungsmittel. Darüber hinaus kann das Kieselgel in einem großen pH-Bereich eingesetzt werden. Ferner entfällt die problematische Regenerierung da die DC/?HPTLC-Platte nur einmalig verwendet wird. Mit einer Normal-Phase wird im wesentlichen Adsorptionschromatographie durchgeführt und Substanzen werden aufgrund ihrer unterschiedlichen Polaritäten aufgetrennt. Mit einer Umkehr(RP)-Phase werden hingegen Lipophilie-Unterschiede der Analyten für eine Verteilungschromatographie genutzt. Zwischen dem Kieselgel als polarer stationärer Phase und RP-18 als typischem Vertreter einer weitgehend unpolaren stationären Phase wird ein breites Sortiment mittelpolarer Übergänge (Aminopropyl-, Diol-, Cyanopropyl-, RP2-Phase) angeboten. ??Sollte eine Kieselgel-Platte immer frisch aktiviert werden? Ist dies nicht unbedingt erforderlich, so sollte eine Aktivierung vermieden werden. Hierdurch würde ein schlecht reproduzierbarer Ausgangszustand geschaffen werden, der zu unterschiedlichen Trennergebnissen führen kann. Bei anspruchsvollen Trennaufgaben und quantitativen Bestimmungen sollte auf erprobte HPTLC-Schichten zurückgegriffen werden. Geringe Teilchengrößen (5 µm) und gleichmäßige Schichten bürgen für hochwertige Trennungen. Ein nochmaliger Qualitätssprung kann durch Auswahl von Lichrospher-Schichten erreicht werden. Deren Teilchen sind auch 5 µm groß, bieten aber eine kugelförmige Gestalt, womit sich höchste Trennqualitäten und um bis zu 40 Prozent verkürzte Laufzeiten ergeben. Sie sind damit prädestiniert für die automatisierte Mehrfachentwicklung (AMD), die man bei Vielkomponentengemischen (z.B. Pflanzeninhaltsstoffe, Phytopharmaka) einsetzt. Diverse Plattenformate und Schichtträger (Glas, Alu- und Plastikfolie) erlauben individuelle Anpassungen an die zu lösenden Aufgaben.??Außer der „universell“ einsetzbaren Kieselgel-Schicht steht dem Analytiker ein breites Sortiment mittel- und unpolarer stätionärer Phasen zur Verfügung. Für das quantitative Arbeiten sind HPTLC- und HPTLC-Lichrospher-Si-60-Schichten zu empfehlen.
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