Um die Zellproliferation und -vitalität zu bestimmen, bietet Carl Roth die kolorimetrische Testlösung Rotitest Vital. Davon reicht 1 ml zur Zählung von 100 Zellproben.
Rotitest Vital, kolometrische testlösung zur bestimmung von Zellvitalität
(Bild: Carl Roth)
Um die Zellproliferation und -vitalität zu bestimmen, bietet Carl Roth die kolorimetrische Testlösung Rotitest Vital. Davon reicht 1 ml zur Zählung von 100 Zellproben. Die Lösung ermöglicht hoch-sensitive Vitalitäts-Assays durch die nicht-radioaktive Zählung proliferierender Zellen. Das Wirkungsprinzip basiert auf dem Tetrazoliumsalz WST-8, welches als Akzeptor für die NADH/NADPH-Dehydrogenase fungiert und dabei zu dem gelb gefärbten Formazan-Farbstoff reduziert wird. Die Menge des Formazan-Farbstoffs, die durch die Aktivität der Dehydrogenasen in proliferierenden Zellen entsteht, ist direkt proportional zur Anzahl lebender Zellen und kann photometrisch gemessen werden. Im Vergleich zu MTT-basierenden Assays ist dieser kolometrische Test achtfach stabiler und fünffach sensitiver. Zudem kann das wasserlösliche WST-8 als Ein-Komponenten-System direkt auf die in Nährmedien kultivierten Zellen gegeben werden. Aufgrund der nichtpermeablen Eigenschaften bleiben die Zellen vital und können direkt in down-stream-Assays einsetzt werden.
Die Testlösung wird direkt in 96-Wells mit kultivierten Zellen zugegeben. Während der Inkubationszeit von einigen Stunden wird von lebenden Zellen ein wasserlöslicher Formazan-Farbstoff (orange) gebildet und in das Zellkulturmedium abgegeben. Die resultierende Farbe wird photometrisch gemessen (ca. 450 nm). Die Testlösung kann auch bei Phenolrot-haltigen Medien verwendet werden.
Rotitest Vital ist in Verpackungseinheiten zu 1, 5 und 20ml erhältlich. Es ist nicht toxisch, stabil bei Raumtemperatur und sehr stabil unter Kühlung. Es wird lichtgeschützt gelagert und darf nicht einfrieren.
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Stand vom 15.04.2021
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