Auswahl des richtigen Lösungsmittels in der (U)HPLC

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Gradient grade

Für die chromatographische Trennung von Substanzen wird in der HPLC neben der isokratischen häufig auch die Gradientenelution eingesetzt. Bei dieser verändert sich innerhalb eines Laufes die Zusammensetzung der mobilen Phase, so nimmt z. B. im Falle der Reversed Phase-Chromatographie der Organik-Anteil zu. Dies kann bei Lösungsmitteln, die nicht speziell für die Gradiententrennung hergestellt wurden, zu einem teils deutlichen Anstieg der Basislinie bei der UV-Detektion führen und die Sensitivität der Methode empfindlich beeinträchtigen. Für eine optimale Chromatographie auch unter den Bedingungen eines Gradienten werden daher Gradient grade Lösungsmittel weiter aufgereinigt. Neben ihrer Eignung für die UV- und Fluoreszenzdetektion werden sie auch spezifisch auf ihre Eignung für die Gradiententrennung hin überprüft, so dass auch bei Gradient grade Lösungsmitteln eine chargenkonsistente Qualität gewährleistet ist.

LC-MS grade

Mit dem Einzug der (Ultra-)Hochdruckflüssigkeitschromatographie (U)HPLC-Massenspektrometrie (MS) in die Labore ergaben sich aufgrund der hohen Nachweisempfindlichkeit und der Art der Analyse neue Anforderungen an die verwendeten Lösungsmittel. So ist das Augenmerk bei der Anwendung in der Massenspektrometrie vor allem auf eine hohe Ionisationseffizienz bei gleichzeitig geringem Ionenhintergrund gerichtet. Dazu werden die Lösungsmittel entsprechend aufgereinigt. Wichtig hierbei sind vor allem die Entfernung von Spurenelementen, organischen Stoffen und (Metall-)Ionen. Diese können zu einem erhöhten Grundrauschen und einer Adduktbildung mit den zu analysierenden Substanzen führen, was die Nachweisempfindlichkeit deutlich herabsetzen kann. Zur Qualitätskontrolle werden die Lösungsmittel gegen Reserpin (m/z 609,49) als Standard getestet. Über den getesteten Massenbereich sind ein nur geringes Grundrauschen sowie keine durch Verunreinigungen verursachten Signale zu verzeichnen. LC-MS grade Lösungsmittel sind aufgrund ihrer sehr hohen Reinheit zudem auch besonders für die Anwendung in der UHPLC geeignet. Sie garantieren eine lange Lebensdauer der UHPLC-Säulen. Deshalb werden sie zusätzlich auch auf ihre Eignung für die UV- und Fluoreszenz-Detektion überprüft.

Fazit

Die unterschiedlichen Lösungsmittelqualitäten haben durchaus ihre Daseinsberechtigung. Der Einsatz von Lösungsmitteln einer der Analytik angemessenen Qualität ist sinnvoll und auch zu empfehlen. Nur so ist eine chargenunabhängige Chromatographie, mit der der Anwender exakte und reproduzierbare Ergebnisse erhält, gewährleistet.

* A. Gilljohann: Altmann Analytik GmbH & Co. KG, 81379 München

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